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车间空气细菌含量检测标准

发布时间:2020-07-23 01:01  

  车间空气细菌含量检测标准_化学_自然科学_专业资料。车间空气细菌含量检测标准 微 生 物 检 验 标 准 第 1页 第 共7 次修改 编号:ⅢA-03-8008-0 页 一、适用范围:本标准规定了出口食品车间的工艺卫生及成品微生物的标准及检验方法。

  车间空气细菌含量检测标准 微 生 物 检 验 标 准 第 1页 第 共7 次修改 编号:ⅢA-03-8008-0 页 一、适用范围:本标准规定了出口食品车间的工艺卫生及成品微生物的标准及检验方法。 本标准适用于实罐一、三车间、面食车间工艺卫生,公司所有产品的成品微生物检验及生产 用水的水质检验。 二、术语: 1、 工艺卫生: 指食品加工工艺过程中卫生指标控制情况, 一般包括操作者的手、 操作案台, 直接接触食品的工器具、空气落菌、半成品、车间用水等的微生物卫生情况。 2、内包装材料:直接接触食品的包装材料,包括塑料袋,塑料片等。 3、菌落总数:指食品检样经过处理,在一定条件下培养后﹙如培养基成分、培养温度和时 间、PH、需氧性质等﹚,所得 1ml(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所 得结果,只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。 4、大肠菌群:指一群能发酵乳糖、产酸产气,需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 三、卫生标准: 物品项目 注 操作台、 工器具 加工区 不得检出 操作者手 50 生加工区 不得检出 空气落菌 个/平板 ≤30 内包装材料 出 个 /100cm2 ≤50 / 熟加工区 / 熟加工区 ≤2.0×102 不得检 生加工区 个/只掌面 熟加工区 ≤1.0×104 < 个/100cm2 ≤1.0×104 <50 生 单位 细菌总数 大肠菌群 备 微 生 物 检 验 标 准 第2 第 页 编号:ⅢA-03-8008-0 共 7 页 次修改 半 (ml) 成 品 ≤5.0×105 ≤1.0×105 ≤1.0×103 不得检出 个 生加工区 熟加工区 /g 成品 四、检验方法: (一) 按各种产品成品标准 工艺卫生:生产正常进行时,每周检验一次。 1、车间工艺卫生检验大肠菌群的检验方法: 1.1 培养基:大肠菌群菌落计数培养基。 1.1.1 成份:蛋白胨 10 克 氯化钠 5 克 磷酸氢二钾(K2HPO4)2 克 或 K2HPO43H2O 2.62 克 乳糖 10 克 去氧胆酸钠 1 克 琼脂 15 克 柠檬酸铁铵 2 克 中性红 0.033 克或 0.0412 克(国产) 蒸馏水 1000ml 1.1.2 制法: 蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾加入蒸馏水加热溶解,并用 10%碳酸钠溶液调 PH7.3-7.5,加 琼脂溶化再加柠檬酸铁铵、去氧胆酸钠溶解后,补充消耗水份,用 250ml 三角瓶分装。每瓶 分装 100ml 高压灭菌, 同时分装 0.33%中性红水溶液 20ml, 20%乳糖溶液 50ml 进行灭菌处理, 采用 8 磅 20 分钟灭菌。临用前以无菌操作向每瓶(100ml 培养基)中加 0.33%中性红水溶液 1.25ml 和 20%乳糖溶液 5ml。 1.2 工器具取样方法 取样面积 100 或 50cm2(冬天取 100 cm2 ,夏天取 50cm2) 用消毒棉签沾无菌蒸馏水揩拭,然后放入 10ml 无菌生理盐水中,充分振摇制成原液。再顺 次以 10 倍递增稀释,取合适稀释倍数接种培养。 微 生 物 检 验 标 准 第 3 页 第 1.3 接种与培养: 共7 次修改 编号:ⅢA-03-8008-0 页 用无菌吸管分别吸取样液 1ml 注入灭菌平皿,做两个平皿,倒入冷至 45℃左右的培养基约 15ml,摇匀凝固后,再在上层倒入 3-5ml 培养基,待凝固后旋转倒置平皿,于 37℃培养 18 小时,选择合适稀释倍数,控制菌落密度在每个平皿 10 个左右。 1.4 结果报告: 平板上出现的大肠菌群呈深红色,菌落直径大于 0.5mm。周围可能有雾状胆盐沉淀,菌落形 态有的边缘整齐,呈圆形,扁平,有的边缘不齐,表面凸起或呈波状,且为玫瑰红色。检验 即为阳性。 每平方厘米上的大肠菌群数=测得的菌落数×稀释度/取样面积, 每平方厘米上的 大肠菌群数不到一个的,可化为每平方上的个数。 1.5 操作者手的检验: 方法同工器具的检验,用灭菌的棉签揩拭手掌面(手背不取),将棉签放入已准备好的灭菌 生理盐水中,震荡摇匀,经适当稀释吸入平皿中,每皿 1ml,作两个平皿,37℃培养 18 小 时,取出计数,计算单位以一只掌面的大肠菌群个数报告结果。 2、车间工艺卫生检验菌落总数的检验方法: 2.1 取样方法:工器具的取样方法同 1.2,操作者手的取样方法同 1.5,取合适稀释倍数接 种培养。 2.2 接种与培养 2.2.1 培养基:普通营养琼脂。 2.2.2 培养:选择 2-3 个适宜的稀释度,吸取 1ml 样液放入灭菌的平皿,每个稀释度作 2 个 平皿,倒入凉至 45℃左右的琼脂摇匀,待凝固后翻转倒置,于 36±1℃培养 24 小时计数。 2.2.3 结果报告:工器具报告每平方厘米的细菌总数,操作者手报告每只掌面的细菌总数。 3、车间工艺卫生检验:空气中菌落总数的测定(沉降法)。 3.1 培养基:普通营养琼脂。 3.2 操作方法: 将培养基溶化加热灭菌后,冷至 45℃左右,倾注灭菌的平皿内, 微 生 物 检 验 标 准 第 4 页 第 编号:ⅢA-03-8008-0 共 7 页 次修改 每皿约 15ml,36±1℃培养 24 小时,检查有无杂菌生长。取无菌的平皿,在车间内的前后、 左右、中间九个点,各放置一个平皿,并打开皿盖 5 分钟后,盖上皿盖,于 36±1℃培养 24 小时,检查菌落生长情况。计算菌落数。 3.3 计算:每立方米菌落数=50000N/AT 式中:A –所用平皿面积(cm2) T–平皿暴露于空气中的时间(分) N–培养后,平皿上的菌落数。 4、原料、半成品卫生细菌检验: 4.1 菌落总数的测定: 4.1.1 培养基:营养琼脂。 4.1.2 样品准备: 以无菌操作,取 25 克样品,放入盛有 225ml 灭菌生理盐水的三角瓶内,充分振摇作成 1: 10 的均匀稀释液,用 1ml 灭菌吸管,吸取 1:10 的稀释液 1ml 注入含有 9ml 灭菌生理盐水 的试管内作成 1:100 的稀释液。 按上述操作顺序作 10 倍递增稀释,每稀释一次,换用一支 1ml 接种灭菌吸管。 4.1.3 培养: 选择 2-3 个适宜稀释度,吸取 1ml 样液放入灭菌的平皿,每个稀释度作 2 个平皿,倒入冷至 45℃左右的琼脂摇匀,待凝固后,翻转倒置,36±1℃培养 24 小时计数。 4.1.4 结果报告: 每克样品中的菌落数乘以稀释倍数。 4.2 大肠菌群的测定: 4.2.1 培养基:大肠菌群菌落计数培养基。 4.2.2 检验方法: 样品制备:以无菌操作,取 25 克样品,放入盛有 225ml 灭菌生理盐水的三角瓶内,充分振 摇作成 1:10 的均匀稀释液,用 1ml 灭菌吸管,吸取 1:10 的稀释液 1ml 注入含有 9ml 灭菌 生理盐水的试管内 微 生 物 检 验 标 准 第 5 页 第 作成 1:100 的稀释液。 编号:A-03-8008-0 共 7 页 次修改 按上述操作顺序作 10 倍递增稀释,每稀释一次,换用一支 1ml 接种灭菌吸管。 接种培养:用无菌吸管分别吸取样液 1ml 注入灭菌平皿,作两个 平皿,倒入冷至 45℃左右的培养基约 15ml,摇匀凝固后再在上层倒入 3-5ml 培养基旋转平 皿,覆盖于表面,37℃培养 18 小时,选择合适稀释倍数,控制菌落密度在每个平皿 10 个左 右阳性率最正确。 4.2.3 结果报告: 结果判定平板上出现的大肠菌群呈深红色, 菌落直径大于 0.5mm。 周围可能有雾状胆盐沉淀, 菌落形态有的边缘整齐, 呈圆形, 扁平, 有的边缘不齐, 表面凸起或呈波状, 且为玫瑰红色。 检验即为阳性。 5、芽胞数的测定 5.1 培养基:营养琼脂培养基(但要以黄豆浸汁代替蒸馏水配制)。(如果鉴别是否为平酸 菌可疑,可加 1.6%溴甲酚紫 2ml/1000 毫升) 5.2 操作方法:无菌操作取半成品 50g,盛装于已灭菌的三角烧瓶中,加生理盐水 50 毫升, 煮沸 15 分钟,用无菌吸管分别吸取 1 毫升注入二只平皿中,倒入凉至 45℃左右的培养基约 15 毫升摇匀,凝固后倒置,放入 37℃恒温箱中培养 48 小时,直接计数。 5.3 报告:二只平皿的平均菌落数就是每克半成品中所含的芽胞数。 6、内包装材料卫生细菌检验: 6.1 细菌总数的测定 6.1.1 培养基:营养琼脂 6.1.2 取样方法 用消毒棉签沾无菌蒸馏水揩拭塑料袋内面或塑料片表面,取样面积 100cm2,然后放入 10ml 无菌生理盐水中, 充分振摇制成原液, 再顺次以 10 倍递增稀释, 取合适稀释倍数接种培养。 6.1.3 接种与培养:选择 2-3 个适宜的稀释度,吸取 1ml 样液放入灭菌的平皿,每个稀释度 作 2 个平皿,倒入凉至 45℃左右的琼脂摇 微 生 物 检 验 标 准 第 6 页 第 编号:ⅢA-03-8008-0 共 7 页 次修改 匀,待凝固后翻转倒置,36±1℃培养 24 小时计数。 6.1.4 结果报告:每 100 cm2 的菌落总数。 6.2 大肠菌群的测定 6.2.1 培养基:大肠菌群计数培养基 6.2.2 取样方法:同 6.1.2 6.2.3 接种与培养: 用无菌吸管分别吸取样液 1ml 注入灭菌平皿, 做两个平皿, 倒入凉至 45℃ 左右的培养基约 15 毫升摇匀,凝固后再在上层倒入 3-5ml 培养基旋转平皿,覆盖于表面, 37℃培养 18 小时,选择合适稀释倍数,控制菌落密度在每个平皿 10 个左右阳性率最正确。 6.2.4 结果报告:平板上出现的大肠菌群呈深红色,菌落直径大于 0.5mm。周围可能有雾状 胆盐沉淀,菌落形态有的边缘整齐,呈圆形,扁平,有的边缘不齐,表面凸起或呈波状,且 为玫瑰红色。 检验即为阳性。 每平方厘米上的大肠菌群数=测得的菌落数×稀释度/取样面积, 每平方厘米上的大肠菌群数不到一个的,可化为每平方上的个数。 (二) 水质检验: 按 GB5750-85 规定的方法进行检验。 本厂主要检验项目:PH、臭和味、混浊度、余氯、细菌总数、大肠菌群。 其余项目送防疫部门检测。 (三)1.速冻蔬菜细菌总数的检测 按 SN0168-92 规定的方法进行。 2.速冻蔬菜大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的检测 按 SN0169-92 规定的方法进行。 源自网络